Comparación del método de secuenciación de las regiones HVI y HVII del ADN mitocondrial con el kit BigDye® Direct Cycle Sequencing y el kit BigDye® Terminator v3.1 Cycle Sequencing

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Luisa Fernanda Gómez Batres

Resumen

En el presente estudio se describen y comparan las características principales del método de secuenciación de las regiones HVI y HVII del ADN mitocondrial con el kit BigDye® Direct Cycle Sequencing y el kit BigDye® Terminator v3.1 Cycle Sequencing; mediante una revisión bibliográfica. La diferencia principal entre el kit BigDye® Direct Cycle Sequencing y el kit BigDye® Terminator v3.1 Cycle Sequencing, es que el primero requiere que los cebadores forward y reverse para PCR incluyan en sus extremos 5´ la cola M13; mientras que el kit BigDye® Terminator v3.1 Cycle Sequencing no la requiere. Además, la purificación de los productos de PCR y ciclo de secuenciación en el kit BigDye® Direct Cycle Sequencing se realizan en un solo paso, lo que reduce una potencial fuente de error por transferencias y el tiempo para el procesamiento de las muestras. Sin embargo, la ventaja del kit BigDye® Terminator v3.1 Cycle Sequencing es que permite re-analizar los productos de PCR de cada muestra ya que no utiliza el volumen completo de los mismos para realizar el ciclo de secuenciación como el kit BigDye® Direct Cycle Sequencing. Por lo anterior, el kit apropiado que puede ser aplicado en el Área de Genética del Laboratorio de Serología y Genética del Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala (INACIF) es el kit BigDye® Direct Cycle Sequencing, al reducir el tiempo del flujo de trabajo del ciclo de secuenciación y minimizar la variabilidad experimental causada por múltiples pasos de manipulación de las muestras.

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Cómo citar
Gómez Batres, L. F. (2021). Comparación del método de secuenciación de las regiones HVI y HVII del ADN mitocondrial con el kit BigDye® Direct Cycle Sequencing y el kit BigDye® Terminator v3.1 Cycle Sequencing. Revista Diálogo Forense, 1(3). Recuperado a partir de https://dialogoforense.inacif.gob.gt/index.php/dialogoforense/article/view/36
Sección
Artículos